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生物玻片具体制作方法

来源:http://www.weikekejiao.com/    日期:2019-02-27    浏览量:载入中...

生物切片从制作的方法来分,有涂片、压片、装片(也叫整装法)、磨片和切片等。下面,小编将给大家讲解几种制作切片的方法,以及怎样对切片的载玻片进行处理。
载玻片是用显微镜观察东西时用来放东西的玻璃片或石英片,制作样本时,将细胞或组织切片放在载玻片上,将盖玻片放置其上,用作观察。盖玻片是盖在载玻片上的材料上的,可以避免液体和物镜相接触,以免污染物镜,并且可以使被观察的细胞上方处于同一平面,即:距离物镜距离相同,使观察到的图像更清晰。
载玻片的处理
① 将玻片插入染色架,加入含中性洗涤剂热水中处理至过夜;
② 用流水冲洗、晾干后,置清洁液中浸泡48h;
③ 用流水冲洗干净,去离子水漂洗,晾干,干热180℃处理3h;
④ 无水乙醇脱水30min,晾干;
⑤ 配3×SSC、1×Denhardt“s液,加热至65℃,将载玻片浸在上述液体中处理3h;
⑥ 冷却后除去上述液体,用去离子水漂洗1min;
⑦ 3∶1(乙醇:冰醋酸)浸育20min,晾干;
⑧ 在2%氨丙基三乙氧基甲硅烷(APES)中浸10秒,丙酮轻洗,焦碳酸二乙酯(DEPC)处理水洗后,42℃温箱过夜,干燥,贮存备用。

生物玻片
一、切片法
1、徒手切片法
徒手切片法简单省时,容易掌握,虽有一定局限性,但至今在生物学教学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法。徒手切片分选材、持物、切片、取片、选片和装片等步骤。
2、石蜡切片法
石蜡切片法所使用的支持剂是石蜡,优点是切下的片子薄而匀,还能作连续切片,但制作手续较复杂,具体可分为固定、冲洗、脱水、染色、浸蜡、切片、透明和封藏八步进行操作。
3、火棉胶切片法
火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温,可以避免组织收缩及变脆,适用精细材料(如脑)的切片,也因火棉胶有韧性,切片不致有折卷或破裂,适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片。
其操作时间短并且步骤简单,所以不易出现组织脱片情况,但是这种方法不能普遍应用于全部基础实验和临床病理诊断中,不处理的玻片直接使用,组织脱片情况非常严重,甚至会造成研究的中断,而直接购买已经处理过的玻片不仅价格昂贵,而且处理效果不一致,所以多数研究人员选择自己处理玻片。
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