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生物显微镜的使用与保养

来源:http://www.weikekejiao.com/    日期:2019-03-19    浏览量:载入中...

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一、生物显微镜的使用
(一)使用环境与习惯
1、使用环境  
显微镜的工作场所应当清洁、干燥、无震动、无腐蚀性气体存在。
2、工作习惯
(1)台面和凳子的高度要适当。
(2)镜检时,即便用单目显微镜,也须两眼同时睁开,用左眼观察。以便右眼绘图或记录。如一只眼睁,一只眼闭,眼睛容易疲劳,无法久看。工作时间较长时,可两眼轮流观察。
(二)使用前的准备
1、光学系统的安装
   对新购或已经卸掉光学系统的显微镜,使用前必须先将显微镜安装起来。安装时,为了防止向下掉灰尘,应按照先上后下的顺序,即按照目镜、物镜、聚光镜、反射镜的顺序来安装。图10-3-1为显微镜的安装图。箭头所示为光学元件的安装位置。
  安装物镜时,应先将镜筒升高或载波物台下降,使转换器与载物台之间保持一定的距离。然后,握往物镜,把它放入转换器的螺丝口处,先略向反时针方向旋转,待物镜配上丝纹后,再按顺时针方向旋入,旋至中等程度松紧即可。安装物镜时,应根据物镜的放大倍数,从小到大顺时针安装。转换物镜时,不要用手推着物镜旋转,那样会使物镜的光轴歪斜。最好用手捏着转换器的转动盘旋转,或用手扶着与物镜转换器衔接处的滚花外圆旋转。 
  目镜和物镜装好后,再将聚光镜插入载物台下面的聚光器支架内。插入的高度应使聚光器升至最高时,聚光镜上透镜的端面稍低于载物台的平面,以免载玻片与聚光器的镜头相碰。然后,将聚光器的固定螺丝旋紧。对非电光源的显微镜来说,最后要把反射镜插入聚光器下面的插孔内。
2、校正光轴
   校正光轴的意义在于使物镜、目镜、聚光镜的主光轴和可变光栏的中心点重合在一条直线上。所以又叫做合轴调节或中心调节。如果光轴歪斜,会使像差增大,分辨率和清晰度都要下降。
  检查方法是将可变光栏开至最大,把低倍物镜旋入光轴,降低镜筒,使物镜与载物台之间的距离小于该物镜的工作距离(5mm以下)。不放标本,调节反射镜的角度,使视场最亮;或调节光源灯的亮度,使视场明暗合适。
   然后,拔掉目镜,直接从镜筒中观察。一边把可变光栏慢慢缩小或打开数次,当光栏关至最小时,光栏的像(此时只有一点点)应正好落在物镜通光孔的中心。当光栏开大到一定程度时,光栏孔的像应正好与物镜通光孔的黑圈相重合。若符合上述两个条件,说明它们“合轴”。否则,就需要调整。
   目镜和物镜都是固定的,无法进行调整。合轴调节主要是调整聚光镜的位置。有些显微镜聚光器支架两旁有两个光轴校正螺丝,调节这两个螺丝,即可合轴。另一种聚光器是由框架上三个相隔120°的螺丝支持住,其中一个装有弹簧,可以伸缩;另外两个螺丝,可以旋动。调整这两个螺丝,便可合轴。
   显微镜的光轴校正好后,如果没有拆下聚光器或其它特殊原因,不必经常校正。
3、准备好标本
准备好高质量的标本备用。
(三)反射镜、聚光器的使用方法和对光方法1、调光
   对采用反射镜的的显微镜,一般都使用平面反射镜去反射太阳的散射光。只有在光线不足或窗外有干扰时,才使用凹面反射镜。
  采用电光源的显微镜,将光亮调合适即行。
2、聚光器的用法
(1)聚光器高度的调节 一般的聚光镜,在平行光照射的情况下,其焦点落在它上端透镜平面中心上方约1.25mm处。当使用高倍镜或油镜时,由于放大率大,镜像亮度小,需要较强的照明。因此,应把聚光器升至最高,以便使聚光镜的焦点正好落在标本平面上。但在使用低倍物镜时,可将聚光器适当下降。
(2)可变光栏的用法 可变光栏起两个作用。一是控制射向标本的光通量;二是改变聚光器的数值孔径。在这两个作用中,后者是主要的。为了使物镜的分辨率得到充分的利用,从原则上说,聚光器的数值孔径应与物镜的相同。否则,分辨率或清晰度会受影响。
3、对光方法 
    对电光源显微镜来说,使用时,只要将光调节在合适的亮度即行。不需要进行对光。但对使用自然光的低档显微镜来说,要想获得良好的观察效果,必须充分利用照明光线。因此,镜检之前应先对光。对光时,将低倍镜旋入光轴,聚光器适当升高,可变光栏开至最大。然后,从目镜中观察,同时转动反射镜,直至视场最明亮、清晰为止。如果利用自然光,则尽量躲避窗框和窗外树枝的干扰。
(四)物镜的正确调焦
  对光完成后或调节合适光亮后,升高镜筒或降低载物台,将标本玻片夹在移动器即标本夹上,并将欲检查的部分移至载物台通光孔的中央,然后开始调焦。
  无论作何种检查,均应从低倍镜开始。调焦时,先用粗动手轮将镜筒下降,使低倍镜的前透镜与盖玻片之间的距离略小于该物镜的工作距离(5mm以下)。为了避免物镜压在标本玻片上,可从侧面窥视。然后,一边从目镜中观察视野,一边利用粗动手轮将镜筒徐徐上升,待初见物像后,改用微动手轮作精细调焦,直至物像最清晰为至。低倍物镜的视场大,有利于观察标本的全貌。也可利用移动器或纵、横向调节手轮寻觅所观察的目标。如有必要,可将寻得的目标移至视场的中心,为高倍镜观察作好准备。
   低倍物镜转换为高倍物镜时,如果物镜是显微镜的原配,所用的载玻片、盖玻片又符合标准,一般都可以进行“等高转换”。即转换后,只要稍微调节一下微调旋钮,即可看到清晰的图像。但油镜不强求齐焦,最好先将镜筒升高后再转换,最后按低倍镜的调焦方法重新调焦。
   使用油镜的方法如下:先将镜筒升高,取下标本玻片,稍稍降低聚光器,并在聚光器的镜头上滴两滴香柏油(油中不应有气泡。如有,可用小木签除去),再将标本玻片放回原处,把聚光器升高,使载玻片的底面与香柏油接触。这样,就完成了聚光镜的油浸。接着,在盖玻片上滴上1滴香柏油。然后从侧面窥视,利用粗调使镜筒尽量下降,直至油镜的前透镜浸没在香柏油中(但尚未接触玻片),这样,又完成了物镜的油浸。然后,一边从目镜中观察,一边利用微动手轮将镜筒缓缓上升(注意不要拧错了方向,压碎盖玻片),直至视野中出现最清晰的物像为止。 
  聚光镜的油浸,还可以采用另一种滴油方法:即不直接把油滴在聚光器的镜头上,而是把载玻片翻过来,将油滴在载玻片的底面上,然后再翻过去,对准放置于聚光器上面,再使聚光器上升,来完成聚光器的油浸。这种方法虽然不那么顺手,但比较安全。有些人使用玻璃棒直接与聚光镜接触来涂抹香柏油,这种方法容易划伤镜片,不宜采用。
  在使用油镜时,允许在聚光镜与标本之间不加香柏油,即聚光镜上仍以空气为介质,但这会牺牲物镜的分辨率。
   如用油镜观察后,如又需要转回高倍物镜观察,应将盖玻片上的油擦去,以免沾污高倍物镜。但聚光器上的油可以不擦,只要把光栏适当缩小一点即可。
  油镜使用完毕后,要及时将香柏油擦拭干净。镜头上可先用干净的擦镜纸擦1~2次,把大部分的油擦掉。然后用二  甲苯滴湿的擦镜纸擦两次,最后用擦镜纸擦干净即行。聚光镜的擦拭方法与此相同。如标本需要保存,玻片上的香柏油可用“拉纸法”擦拭干净。即将擦镜纸复盖在玻片上,在纸上滴上一滴二甲苯,趁湿将纸条平拖着往外拉,连续几次即可擦干净。
显微镜

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